Журнал «Клиническая лабораторная диагностика», №12, 2000 год
Издательство «Медицина», Москва
© Г.В. МОРДВИНОВ, И. В. МОРДВИНОВА, 2000
РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ РЕВМАТОИДНОГО ФАКТОРА СРЕДИ ЗДОРОВОГО НАСЕЛЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ МОЛДОВА
Кафедра лабораторной диагностики факультета усовершенствования врачей Кишиневского медицинского университета им. Н. А. Тестемицану.
Ревматоидный фактор (РФ) представляет собой группу аутоантител, принадлежащих к сывороточным иммуноглобулинам IgG, IgM или IgA, реагирующих с Fc-фрагментом IgG. В ревматологической практике определение РФ является одним из наиболее часто выполняемых исследований у пациентов с суставными симптомами. РФ присутствует у 80% пациентов с клинически и радиологически доказанным ревматоидным артритом (РА), его обнаружение является одним из критериев для диагностики этого заболевания [3,5]. В то же время, выявление РФ у практически здоровых людей не позволяет однозначно решить вопрос о его роли в патогенезе РА. По разным данным, у здоровых людей в возрасте до 30 лет РФ выявляется в латекс-тесте в 3,08%, а реакцией Ваалера—Розе в 0,07% случаев. У пациентов в возрасте 60—68 лет картина меняется: РФ выявляется в 27,8 и 2,1% случаев соответственно [2]. Роль и значение выявляемого у этой группы РФ до недавнего времени оставались неясными.
Учитывая значимость этого вопроса, в Финляндии и Исландии были осуществлены национальные программы по массовому обследованию здоровых людей на наличие у них РФ [7,9]. На большом числе наблюдений (в Исландии, например, 13 858 человек) было показано, что через 5 лет у людей с выявленным РФ в 19—40% в одном исследовании и до 71% в другом развился РА. Был сделан вывод о первичной роли РФ в патогенезе РА и о его серьезной значимости для ранней диагностики этого заболевания. Прогностическая значимость раннего выявления РФ для последующего развития РА подтверждается и другими авторами [6].
Таким образом, изучение распространенности РФ среди здоровых может дать важную информацию о наличии ранних или скрытых форм РА в популяции, позволит формировать группы риска и проводить ранние профилактические мероприятия на доклиническом этапе развития болезни.
Целью данной работы было изучение распространенности РФ среди здорового взрослого населения Республики Молдова.
Материалы и методы.
Для выявления РФ, реагирующего с модифицированным IgG человека, использовали тест латексной агглютинации на стекле-слайде с помощью набора “Refa-Tex” производства “Dac-SpectroMed SRL” (Молдова) с чувствительностью, равной З IU/ml РФ. Набор позволяет проводить скрининговое выявление РФ в цельной сыворотке и в дальнейшем определять активность РФ не только по величине титра, но и в международных единицах IU/ml.
Реакцию Ваалера—Розе проводили по унифицированной методике [4] с использованием консервированных эритроцитов барана. При этом параллельно определяли титр нормальных антител с диагностикумом “Nab-Dac” производства “Dac-SpectroMed SRL” (Молдова) и учитывали это значение. Поэтому положительным считали титр реакции, начиная с разведения 1:2. Чувствительность реакции составляла 1,5—З IU/ml РФ.
Комбинированный тест ставили с диагностическим набором “Refa-Dac“(“Dac-SpectroMed SRL”, Молдова). В этом диагностикуме на поверхности эритроцитарного носителя ковалентно фиксированы модифицированный IgG человека и ориентированные Fc-фрагментом IgGкролика. Чувствительность диагностикума составляла З IU/ml РФ.
Контроль качества и уровня чувствительности диагностических наборов проводили с использованием контрольных иммунологических материалов фирмы “Вiо Rad” (США) Liquichek Reumatoid Factor Control Levels 1, 2 и 3 с известным содержанием РФ.
Сыворотки доноров получали на Республиканской станции переливания крови. Все доноры были предварительно осмотрены терапевтом и признаны практически здоровыми. Все сыворотки тестированы на наличие антител к вирусам СПИДа, гепатита и сифилиса.
Результаты исследований.
Обследовано 1009 практически здоровых людей, из которых 524 (51,9%) составляли мужчины и 485 (48,1%) — женщины (табл. 1). Возраст доноров был от 17 лет до 61 года, средний возраст — 34 года. РФ определяли всеми тремя методами.
У практически здоровых людей РФ в реакции с модифицированным IgG человека (латекс-тест) был обнаружен у 24,4% обследуемых. Из них у 9,36% доноров активность РФ составила З IU/ml (реакция с неразведенной сывороткой), у 5,78% — 6 IU/ml (разведение сыворотки 1:2), у 3,88% — 12 IU/ml (титр 1:4), у 3,88% — 24 IU/ml (титр 1:8) и у 1,49% активность была 48IU/ml и выше. В реакции Ваалера—Розе положительными оказались
8,8% сывороток, из них 8,26% с активностью РФ З IU/ml (титр 1:2) и 0,54% с активностью 6 IU/ml (титр 1:4). При тестировании с комбинированным диагностикумом “Refa-Dac” положительными оказались 10,5% сывороток, из них 8,62% с активностью РФ б IU/ml (титр 1:4), 1,49% с активностью 12 IU/ml (титр 1:8) и 0,39% с активностью 24 IU/ml.
Таблица 1.
Распределение практически здоровых людей по возрасту
Возраст, годы
|
Мужчины
|
Женщины
|
Всего
|
17-29
|
239
|
115
|
354
|
30-39
|
170
|
181
|
351
|
40-49
|
93
|
167
|
260
|
50 и старше
|
22
|
22
|
44
|
Итого
|
524
|
485
|
1009
|
Таким образом, количество сывороток с активностью РФ выше общепринятого диагностически значимого уровня 20 IU/ml составило в латекс-тесте 5,37%, в тесте с “Refa-Dac” - 0,39%, в реакции Ваалера-Розе такие сыворотки отсутствовали.
Результаты и обсуждение.
Выявляемость РФ с активностью выше 20 IU/ml среди практически здоровых людей в Республике Молдова не отличается от известных данных литературы и находится на уровне 5—6%. Иная картина складывается при изучении случаев обнаружения РФ с более низкой активностью. Активность РФ ниже 20 IU/ml в латекс-тесте обнаружена у 19,03% доноров, в реакции Ваалера-Розе — у 8,8%, в тесте с “Refa-Dac” - у 10,11%. Такое широкое распространение РФ с более низкой активностью может свидетельствовать о предрасположенности части взрослого здорового населения к развитию РА.
Особый интерес представляет распределение РФ среди доноров в зависимости от пола и возраста, так как известно, что женщины в 3 раза чаще заболевают РА, чем мужчины. РФ с активностью З IU/ml и выше был выявлен у 33,1% всех обследованных, в том числе у 30,2% мужчин и у 36,5% женщин (р < 0,05; табл. 2).
Таблица 2.
Распределение РФ в зависимости от возраста и активности (в %) среди практически здоровых людей
Возраст, годы
|
Мужчины
|
Женщины
|
Всего
|
Активность РФ, IU/ml
|
<20
|
>20
|
<20
|
>20
|
<20
|
>20
|
17-29
|
26,8
|
2,01
|
36,0
|
12,3**
|
|
|
30-39
|
27,5
|
2,34
|
23,8
|
7,73*
|
|
|
40-49
|
37,6
|
5,38
|
25,1
|
8,38
|
|
|
50 и старше
|
26,3
|
5,26
|
35,8
|
5,0
|
|
|
Итого
|
27,3
|
2,91
|
28,04
|
8,45**
|
27,6
|
5,58
|
Достоверность различий показателей у женщин и мужчин:
* p<0,05
**p<0,001
РФ с активностью выше 20 IU/ml встречался у 5,58% обследованных, и у женщин (8,45%) этот показатель достоверно выше, чем у мужчин (2,9 1%; р<0,001). РФ с активностью выше 20 IU/ml встречался у женщин чаще, чем у мужчин, практически во всех возрастных группах: в группе от 17 до 29 лет у женщин РФ был выявлен в 12,3%, а у мужчин — только в 2,01% (р<0,001), от 30 до 39 лет — в 7,73 и 2,34% (р<0,02), от 40 до 49 лет — в 8,38 и 5,38% соответственно, и только в группе от 50 лет и старше у мужчин этот показатель был несколько выше:5,26 против 5,0% у женщин.
Совершенно иная картина получена при изучении распределения РФ с активностью ниже 20 IU/ml. РФ с подобной активностью встречалсяу 27,6% обследованных, и по количеству случаев уженщин и мужчин этот показатель практически неразличался (28,04 и 27,3% соответственно). В возрастной группе от 17 до 29 лету женщин такой РФ был выявлен в 36,03%, а у мужчин — в 26,8%, от 30 до 39 лет — в 23,8 и 27,5%, от 40 до 49 лет — в 25,1 и 37,6% соответственно, и в группе от 50 лет и старше у мужчин этот показатель был 26,3%, у женщин — 35,0%. Таким образом, во всех возрастных группах, несмотря на определенные отличия, различия в распределении РФ с активностью ниже 20 IU/ml у мужчин и женщин оказалась статистически недостоверными.
Частота выявления РФ с активностью выше 20 IU/ml у мужчин с возрастом повышается, например, в группе 17—29 лет она составила 2,01%, 30—39 лет — 2,34%, 40—49 — 5,38%, старше 50 лет — 5,26%. Пик частоты встречаемости РФ приходится на группу 40—49 лет.
У женщин же динамика распространения РФ с активностью выше 20 IU/ml имеет обратный характер: в группе 17—29 лет такая активность выявлена в 12,3%, 30—39 лет — в 7,73%, 40—49 лет — в 8,39%, старше 50 лет — в 5,0%. Такая динамика может быть объяснена тем, что люди с повышенным РФ заболевают РА и впоследствии переходят в категорию больных. РФ с активностью ниже 20 IU/ml чаще встречается в группах 17—29 и старше 50 лет (36,0 и 35,0% соответственно). В группах от 30 до 49 лет этот показатель находится на уровне примерно 24%.
Таким образом, то, что у женщин РФ встречается достоверно чаще, чем у мужчин, может служить объяснением более высокой частоты заболеваемости женщин РА. То, что эта разница наиболее высока в группах от 17 до 39 лет, т. е. в периоде, предшествующем возрастному пику заболеваемости у женщин, тоже подтверждает данное предположение.
Приведенные данные позволяют сделать заключение о важности выявления РФ с активностью ниже 20 IU/ml среди практически здоровых лиц (особенно женщин) для последующего формирования групп с высоким риском развития РА. Другим аспектом этой проблемы может являться необходимость пересмотра подхода к самому определению понятия “диагностически значимый уровень” для РФ. Если принять за основу предположение о существовании связи между выявлением любых положительных значений РФ и повышенным риском развития РА, то следует отнести к группе риска всех пациентов с активностью РФ ниже 20 IU/ml.
Для этого необходимо использовать диагностикумы с более высокой чувствительностью. Существующие агглютинационные тест-системы со стандартной чувствительностью позволяют выявлять РФ с активностью выше 20 IU/ml. Использование тестов, позволяющих выявлять РФ с активностью 1,5—3 IU/ml, дает возможность формировать группы риска на этапе доклинического развития патологического процесса. Для этого можно использовать иммуноферментные, радиоиммунологические и агглютинационные диагностические наборы с повышенной чувствительностью. Это позволит начать соответствующие превентивные медицинские процедуры.
Другим важным вопросом является гетерогенность РФ, практическое значение которой заключается в том, что диагностические тест-системы с различными антигенными субстратами выявляют различные фракции РФ. Известно, что встречаются РФ, которые, реагируя только с модифицированным IgG человека в латекс-тесте, не реагируют с Fc-фрагментом кроличьего IgG в реакции Ваалера-Розе, и наоборот [8]. Мы изучили выявляемость РФ в зависимости от используемого метода. Сывороток доноров, которые реагировали только в латекс-тесте и не реагировали с другими диагностикумами, оказалось 3,49%, только в реакции Ваалера-Розе — 3,89%, а только с диагностикумом “Refa-Dac” - 16,5%. Общее же количество положительных по РФ сывороток составило 33,1%. Как следует из приведенных результатов, ни один используемый метод не позволяет выявить все случаи положительного РФ. Этот диапазон колеблется от 3,49% для латекс-теста до 16,5% для диагностикума “Refa-Dac”. Таким образом, количество положительных результатов, полученных только с одним из диагностикумов, составляет 72,1% от всех положительных результатов.
Тестирование сывороток несколькими методами существенно повышает выявляемость РФ. На пример, использование латекс-теста и “Refa-Dac” позволяет выявить 78,5% всех положительных результатов, при сочетании латекс-теста и реакции Ваалера-Розе этот показатель равен 33,2%, а при сочетании реакции Ваалера—Розе и “Refa-Dac” - 66,1%. Тем не менее, оптимальным является использование всех трех тест-систем.
Полученные результаты указывают на то, что у практически здоровых могут встречаться несколько фракций РФ (как минимум 3), с различной антигенной специфичностью. Роль таких РФ у доноров нуждается в дальнейшем изучении.
Выводы.
1. Среди практически здорового на селения Республики Молдова РФ выявлен у 33,1%, причем случаи с активностью РФ ниже 20 IU/ml составили 27,1%, а выше — 5,58%.
2. У практически здоровых женщин РФ встречается достоверно чаще, чем у мужчин, особенно в возрастной группе от 17 до 39 лет.
3. Для достоверного выявления РФ необходимо тестирование сыворотки пациента как минимум в латекс-тесте и в комбинированным тесте с дополнительными антигенными структурами “Refa-Dac”. Использование только одного теста, по нашему мнению, совершенно недостаточно.
4. У практически здоровых женщин частота вы явления РФ с возрастом снижается, в то время как у мужчин — повышается.
ЛИТЕРАТУРА:
- Мордвинов Г. В., Мордвинова И. В. Диагностикум для определения ревматоидного фактора и способ его получения, — Пат. № 672, 1996. Молдова.
- Ревматические болезни / Под ред. В. А. Насоновой, Н. В. Бунчука. — М., 1997.
- Сигидин Я. А., Гусева Н. Г., Иванова М. М. Диффузные болезни соединительной ткани. — М., 1994.
- Справочник лабораторных методов исследования в клинике (Справочник) / Под ред. В. В. Меньшикова. — М., 1987. — С. 282—284.
- Arnett F.C., Edworthy S.M., Bloch D.A. et. al. / Arthr. And Rheum. – 1998. – Vol. 31. – P.315-324
- Heliovaara M., Aho K., Reunanen A. et. al. / Br. J. Rheumatol. –1995. – Vol.34 # 7. – P. 625-628
- Jonsson T., Thorsteinssonj T., Kolbeeinsson A. / Ann. Rheum. Dis. – 1992. – Vol. 51, # 7. – P. 863-868.
- Tuomi T. / Clin. Exp. Immunol. – 1989. – Vol. 77. – P.349-355.
- Tuomi T, Heliovaara M., Maatela J. et. al. / Abstracts 11-th Eur. Immunol. Meet., Espoo., June, 1991. – Helsinki, 1991. – P. 36.
|
Скачать весь каталог:
PDF
DOC
